DNA-za I (wolna od RNA-zy) jest endodeoksyrybonukleazą degradującą ssDNA, dsDNA oraz DNA w kompleksach DNA-RNA. Aktywność DNazy ściśle zależy od obecności jonów Ca²⁺, a także Mg²⁺ lub Mn²⁺.

Zastosowanie

• usuwanie DNA z preparatów RNA 
• usuwanie matrycy DNA po transkrypcji in vitro
• wprowadzanie nacięć do dsDNA przed znakowaniem metodą pęknięć (ang. nick translation)
• w eksperymentach typu "footprinting" w celach lokalizacji miejsc wiązania białek z DNA